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如何進(jìn)行ELISA的質(zhì)量檢測(cè)
ELISA Kit的多指標(biāo)決定了產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)劣,優(yōu)秀的試劑盒需要對(duì)如下6大項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定評(píng)估,分析如下:
1、準(zhǔn)確性
ELISA Kit的多指標(biāo)決定了產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)劣,優(yōu)秀的試劑盒需要對(duì)如下6大項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定評(píng)估,分析如下:
a.回收率:測(cè)定試劑盒對(duì)數(shù)據(jù)真實(shí)性的校準(zhǔn),過(guò)高或偏低會(huì)產(chǎn)生加樣和假性性的失準(zhǔn)數(shù)據(jù)。
b.線性:測(cè)定試劑盒稀釋液與樣本微環(huán)境的的準(zhǔn)確性,過(guò)高或偏低均會(huì)出現(xiàn)測(cè)定的偏差。
2、精確度
a.板內(nèi)精確度:評(píng)價(jià)單次實(shí)驗(yàn)中,同一個(gè)已知濃度不同復(fù)孔的差異。
b.板間精確度:評(píng)價(jià)同一樣本,多次實(shí)驗(yàn)的差異。
3、精密度
檢測(cè)限:能顯著區(qū)分空白信號(hào)的最小信號(hào)值對(duì)應(yīng)的濃度,用于評(píng)估試劑盒的靈敏度,值越低試劑盒靈敏度越高。
4、特異性
a.交叉反應(yīng):評(píng)判特異性,不同分子與試劑盒抗體結(jié)合能力,交叉反應(yīng)越大,特異性越差。
b.抗干擾能力:同源物的干擾,內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的干擾。
5.天然樣本檢測(cè)性
對(duì)天然樣本及合適的樣本類(lèi)型檢測(cè)分析。對(duì)天然樣本類(lèi)型確定,避免假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。
6、穩(wěn)定性
試劑盒時(shí)效性和穩(wěn)定性是對(duì)指標(biāo)檢測(cè)的重要保障。穩(wěn)定性越高,試劑盒存儲(chǔ)時(shí)間越久。
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