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1、培育果蠅的器皿要嚴(yán)格消毒。培育瓶洗潔凈后,自然涼干,再與棉塞一道進(jìn)行高溫枯燥滅菌(120℃,30min) 。
2、養(yǎng)分要全面。種類許多,本實(shí)驗(yàn)室用的是玉米培育基。
配方:
水750mL煮開,加瓊脂6.2g,待瓊脂溶解后加白糖62.5g,拌和溶解后加調(diào)成糊狀的玉米糊,煮開2~3min,加酵母粉7g,加熱1~2min,拌和均勻后,移去火源,加丙酸2mL。培育基稍稍冷卻后,倒入已滅菌的瓶中,盡量不要粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余熱的枯燥箱中將瓶壁上的水蒸干。
3、接種時(shí)消好毒。在無菌室內(nèi)接種,如沒有無菌室,在接種前用75%酒精棉球擦雙手一遍。接種后,放入適宜果蠅成長(zhǎng)溫度的培育箱中培育果蠅(溫度20~25℃),一旦下一代成蠅孵出來后,這樣就就不易長(zhǎng)霉啦。
培育基的霉后處理辦法
由于霉菌孢子漂浮于培育瓶的整個(gè)空間,包括果蠅身上,如將此果蠅接種到新的里邊,大約經(jīng)過4 ~5d,培育基將會(huì)重新長(zhǎng)出霉菌來。遇到該問題,解決的辦法只要兩種:① 不再接種這種長(zhǎng)霉菌果蠅,重新接種未長(zhǎng)霉的果蠅;② 采取辦法殺死果蠅身上的霉菌孢子。
殺霉菌辦法:
將帶有霉菌孢子的成蠅倒入空培育瓶中,棉塞上倒適量的75%酒精,再將瓶口塞緊,使用酒精具有蒸發(fā)性,蒸發(fā)后的酒精充滿整個(gè)瓶?jī)?nèi),從而將果蠅身上的霉孢子殺死。
上海酶聯(lián)生物提醒注意:
1、倒在棉塞上的酒精量要適宜,過多果蠅易醉昏,過少殺死不了霉菌孢子;
2、果蠅呆在空瓶?jī)?nèi)的時(shí)間要恰當(dāng),以2d為好。
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