ELISA試劑盒常見問題

這里就簡單整理了5個問題，具體內(nèi)容如下：

1、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？

我司在各大論壇看到最多的三個答案：

1）48T 可做42個樣本加6個標準曲線；96T 可做90個樣本加6個標準曲線

2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢測，最多還能檢測80個標本；48T的最多30個樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？

96T，一般做復孔的話，做標準曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、ELISA試劑盒想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用，現(xiàn)在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？

如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。ELISA試劑盒建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。

不過ELISA最好少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒可測濃度。