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為何牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中如此受寵呢?

更新時(shí)間:2024-04-30      瀏覽次數(shù):137

為何牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中如此受寵呢?


1. 提供結(jié)合蛋白:作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。

2. 提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。

3. 提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生等是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。

4. 提供激素和各種生長(zhǎng)因子。

5. 對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。


        針對(duì)第五個(gè)原因,我們來(lái)重點(diǎn)談?wù)?。有一些?xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。

        我司技術(shù)員分析,這是因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了的粘度可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用。

        特別說(shuō)明到了有多位老師提出問(wèn)題:人血清一定要加熱滅活嗎?不然會(huì)怎樣?其實(shí)對(duì)于它的加熱滅活是應(yīng)該根據(jù)情況而定的。

        很多朋友在使用實(shí)驗(yàn)者認(rèn)為一定需要加熱滅活,其實(shí)這個(gè)認(rèn)知是不正確的,是否需要滅活是要根據(jù)情況而定。人們通常通過(guò)在56℃加熱30分鐘的辦法,來(lái)滅活其中的補(bǔ)體,以及其中可能的微生物(比如支原體)的污染。

        加熱滅活帶來(lái)的問(wèn)題是,其中的氨基酸、維生素和生長(zhǎng)因子等也會(huì)不同程度的被破壞。

        但是它的補(bǔ)體含量很低,即使在未稀釋的胎牛血清中,也觀察不到溶血現(xiàn)象。另外37℃的加熱能夠有效滅活補(bǔ)體。所以對(duì)它而言,并不需要通過(guò)專門的熱滅活來(lái)滅活其中的補(bǔ)體。

        早期的人血清制備中的濾膜的孔徑大于0.22um,不能有效的去除支原體的污染。熱滅活可以去除支原體的污染。但是現(xiàn)在制備中的終端濾膜的孔徑為0.1um甚至小到0.04um,所以一般沒(méi)有支原體的污染。


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