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簡要描述:上海篤瑪生物科技有限公司專業(yè)研發(fā) ELISA試劑盒長期為全國科研機構(gòu)、高校和科研人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,在保證產(chǎn)品質(zhì)量的同時,我們還配有扎實的售后技術(shù)咨詢和服務(wù)人Sestrin 1蛋白(SESN1) ELISA 試劑盒
人Sestrin 1蛋白(SESN1) ELISA 試劑盒
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的標(biāo)準(zhǔn)品可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
6. 若中英文說明書有誤,請以中文說明書為準(zhǔn)。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 實驗前的準(zhǔn)備:
在操作前,請確保所有試劑和工具都已準(zhǔn)備好,并按照試劑盒說明書的要求進行操作。同時,請確保實驗室環(huán)境干凈、整潔,以避免交叉污染。
2. 樣本處理:
按照試劑盒說明書的要求,將待測樣本進行處理。一般來說,需要將樣本進行稀釋,以便后續(xù)的檢測。同時,應(yīng)確保樣本的濃度符合試劑盒的要求。
3. 加樣:
將處理好的樣本加入到酶標(biāo)板中,根據(jù)試劑盒說明書的加樣量進行操作。確保加樣的準(zhǔn)確性和一致性,以獲得準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。
4. 孵育:
將酶標(biāo)板密封,并在適宜的溫度下孵育一定時間,使樣本與LAMA4抗體充分結(jié)合。孵育時間根據(jù)試劑盒說明書的要求而定。
5. 洗滌:
在孵育完成后,按照試劑盒說明書的要求進行洗滌,以去除未結(jié)合的物質(zhì)。洗滌的次數(shù)和方式也根據(jù)試劑盒說明書的要求而定。
6. 顯色反應(yīng):
在加入顯色液后,將酶標(biāo)板在適宜的溫度下孵育一定時間,使顯色反應(yīng)進行。顯色反應(yīng)的時間和溫度根據(jù)試劑盒說明書的要求而定。
7. 終止反應(yīng):
在顯色反應(yīng)完成后,加入終止液,使反應(yīng)停止。同時,調(diào)整溶液的PH值,使其達到適宜的范圍。
8. 檢測:
在加入終止液后,使用酶標(biāo)儀在適宜的波長下測量各孔的光密度值。記錄測量結(jié)果,并根據(jù)試劑盒說明書提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線或公式計算LAMA4的濃度。
9. 結(jié)果分析:
根據(jù)實驗結(jié)果,分析樣本中LAMA4的濃度,并對其生物學(xué)意義進行解釋。同時,應(yīng)考慮到實驗的誤差和不確定性,對結(jié)果進行合理的解讀和推斷。
10. 實驗后處理:
在實驗完成后,按照實驗室規(guī)定正確處理廢棄物。同時,對實驗場所和儀器進行清潔和整理,以確保實驗室環(huán)境的衛(wèi)生和安全。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
人Sestrin 1蛋白(SESN1) ELISA 試劑盒
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