人C1q腫瘤壞死因子相關蛋白9(C1QTNF9) ELISA 試劑盒

實驗原理

本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附法測定標本中水平。用純化的抗體包被酶標板，制成固相抗體，往包被單抗的酶標板中依次加入樣本，再與HRP標記的抗體結(jié)合，形成免疫復合物，經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的酶標抗體，再加入底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長測量光密度，通過標準曲線計算樣品中的濃度。

試劑、材料、樣本和緩沖液

1. ELISA試劑盒
2. 酶標板、洗滌液、樣品稀釋液、標準品、質(zhì)控品
3. 實驗室常用儀器：移液器、酶標儀、洗板機
4. 樣本收集和處理：收集血清或血漿樣本，處理前需離心分離，避免細菌污染。

人C1q腫瘤壞死因子相關蛋白9ELISA 試劑盒

操作步驟

1. 標準品的稀釋：按照試劑盒說明書進行標準品的稀釋，確保準確配制。
2. 加樣：分別將100μL標準品和待測樣本加入相應的孔中，確保加樣均勻，避免產(chǎn)生氣泡。
3. 孵育：將酶標板封閉，在37℃下孵育1小時，確保充分反應。
4. 洗滌：清洗5次，每次清洗后要倒干凈液體，避免殘留影響實驗結(jié)果。
5. 加酶標抗體：將50μL酶標抗體加入每個孔中，確保加樣均勻。
6. 孵育：將酶標板封閉，在37℃下孵育1小時，確保充分反應。
7. 洗滌：清洗5次，每次清洗后要倒干凈液體，避免殘留影響實驗結(jié)果。
8. 加底物：將50μL底物溶液加入每個孔中，確保加樣均勻。
9. 顯色：在37℃下孵育15-30分鐘，觀察顏色變化。
10. 終止反應：加入50μL終止液，立即混勻。
11. 檢測：用酶標儀在450nm波長處測量光密度，記錄數(shù)據(jù)。

結(jié)果分析

根據(jù)標準品濃度和對應的OD值繪制標準曲線，通過標準曲線計算樣品中的濃度。如果樣品濃度超過線性范圍，需要進行稀釋后再進行測定。濃度單位為pg/mL或ng/mL。

注意事項

1. 試劑盒保存在2-8℃，避免反復凍融。
2. 避免直接接觸標準品和質(zhì)控品，防止交叉污染。
3. 加樣時要保證加樣均勻，避免產(chǎn)生氣泡。
4. 洗滌時要保證洗滌液倒干凈，避免殘留影響實驗結(jié)果。

人C1q腫瘤壞死因子相關蛋白9ELISA 試劑盒