僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

人原纖蛋白1(FBN1) ELISA 試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應(yīng)孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時(shí)。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng)：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取各孔的光密度值。

人原纖蛋白1(FBN1) ELISA 試劑盒

注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存于2-8℃，切勿反復(fù)凍融或長(zhǎng)時(shí)間保存于室溫。

2. 實(shí)驗(yàn)前確保所有試劑均已恢復(fù)至室溫。

3. 加樣時(shí)注意避免產(chǎn)生氣泡。

4. 洗滌時(shí)要保證充分洗滌，避免殘留物影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5. 底物溶液應(yīng)避光保存，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中。

6. 酶標(biāo)儀應(yīng)使用450nm波長(zhǎng)進(jìn)行讀數(shù)，其他波長(zhǎng)可能導(dǎo)致誤差。

7. 本試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)和診斷參考，不適用于臨床診斷和治療。

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過計(jì)算得到待測(cè)樣品的濃度。

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