人游離血紅蛋白(f-Hb) ELISA 試劑盒    

試劑盒性能

 檢測范圍：5 pg/mL – 160 pg/mL。

 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pg/mL。

 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

 重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

樣本處理

1.組織取出前盡量進行心臟灌流

2.組織表面不能有毛發(fā)等不相關組分

3.組織稱重(mg)后立即放入EP管中

4.向EP管中加入9倍量的PBS (μL)

5.用勻漿機進行組織勻漿

6.離心

7.小心吸取上清

實驗步驟

1. 準備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標二抗：每孔加入50μl酶標二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值，利用標準品繪制的標準曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算得到待測樣品的濃度。

人游離血紅蛋白(f-Hb) ELISA 試劑盒      

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