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人血小板親和蛋白1(PKP1) ELISA 試劑盒
準備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設置好振板器、洗板器
9.準備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標準品
11.配制不同濃度的標準品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預實驗結(jié)果稀釋樣本
14.準備好封板膜
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
實驗步驟
1. 準備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標二抗:每孔加入50μl酶標二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應:每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數(shù):用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值,利用標準品繪制的標準曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
人血小板親和蛋白1(PKP1) ELISA 試劑盒
注意事項
1. 試劑盒保存于2-8℃,切勿反復凍融或長時間保存于室溫。
2. 實驗前確保所有試劑均已恢復至室溫。
3. 加樣時注意避免產(chǎn)生氣泡。
4. 洗滌時要保證充分洗滌,避免殘留物影響實驗結(jié)果。
5. 底物溶液應避光保存,避免長時間暴露于空氣中。
6. 酶標儀應使用450nm波長進行讀數(shù),其他波長可能導致誤差。
7. 本試劑盒僅用于科研實驗和診斷參考,不適用于臨床診斷和治療。
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試劑盒 必知說明:
1)只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,
2)不能混用其他制造商的產(chǎn)品,只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到好的檢測結(jié)果。
3)由于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風險。
4)實驗結(jié)果與試劑盒的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關。
5)請務必準備充足的標本備份。
6)不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,
如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
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