猴泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)免疫試劑盒     

ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)

1. 特異性高：由于是抗原抗體的特異性結(jié)合，因此試驗(yàn)的特異性很高，能夠排除其他物質(zhì)的干擾。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗(yàn)的靈敏度大大提高，能夠檢測出微量的抗原或抗體。

3. 操作簡便：ELISA試驗(yàn)操作相對簡單，容易掌握，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。

實(shí)驗(yàn)原理

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，通過酶對底物反應(yīng)的顯色反應(yīng)，對樣本中的待測物質(zhì)進(jìn)行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便、適用范圍廣等特點(diǎn)，因此在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和食品安全檢測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1. 抗原和抗體的儲存：應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求存放抗原和抗體，避免反復(fù)凍融和長時間暴露在高溫環(huán)境中。同時要保證試劑盒未過期，以獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2. 加樣技術(shù)：加樣時應(yīng)保證加入的體積準(zhǔn)確且不產(chǎn)生氣泡，避免加在孔壁的邊緣，以免影響與固相表面的接觸。加樣時應(yīng)在每孔的旁邊放置一個加樣對照孔，以監(jiān)測加樣的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

3. 溫育：溫育是ELISA實(shí)驗(yàn)中的重要步驟，溫育時間和溫度的控制對于抗原抗體反應(yīng)的進(jìn)行和結(jié)果的影響至關(guān)重要。必須嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行溫育，并注意保持恒溫狀態(tài)。

4. 洗滌：洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中的一步，它可以去除未結(jié)合的物質(zhì)，提高檢測的特異性和靈敏度。洗滌時應(yīng)保證每次洗滌時間充足，并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時要避免在洗滌過程中產(chǎn)生氣泡，以免影響洗滌效果。

猴泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)免疫試劑盒  

準(zhǔn)備工作

1.孔板室溫平衡1小時

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒

5.準(zhǔn)備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器

9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說明書提示，溶解標(biāo)準(zhǔn)品

11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本

14.準(zhǔn)備好封板膜

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實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應(yīng)孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng)：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值，利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過計(jì)算得到待測樣品的濃度。

售后

試劑盒售后：本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量，質(zhì)量問題均可免費(fèi)退換，另提供免費(fèi)代測服務(wù)。

細(xì)胞售后：

1、細(xì)胞運(yùn)輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；

2、細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題，請?zhí)峁┘?xì)胞照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題的照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟，并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā)，具體可以參照我或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。

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