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簡(jiǎn)要描述:上海篤瑪生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)各種ELISA試劑盒產(chǎn)品,主要包括:人、 大小鼠、兔、犬、牛、猴、豬、昆蟲(chóng)、植物、農(nóng)殘等種屬ELISA 試劑盒。猴肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(DMD)酶聯(lián)免疫試劑盒
猴肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(DMD)酶聯(lián)免疫試劑盒
產(chǎn)品包裝:盒裝
性狀:瓶裝液體
規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃
保存期限:6個(gè)月
運(yùn)輸條件:2-8℃低溫運(yùn)輸,用干冰或者生物冰袋低溫運(yùn)輸。
猴肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(DMD)酶聯(lián)免疫試劑盒
標(biāo)本的稀釋原則:首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N"倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N"。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
生物su標(biāo)記抗體的稀釋原則:臨用前以生物su標(biāo)記抗體稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su標(biāo)記抗體加990μl生物su標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 抗原包被:將抗原溶液加入到酶標(biāo)板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一層薄膜。
2. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。
3. 阻斷:加入阻斷液,封閉酶標(biāo)板孔中的非特異性結(jié)合位點(diǎn),以減少非特異性結(jié)合。
4. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。
5. 加樣:加入待測(cè)樣本,使其與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。
6. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的樣本和其他雜質(zhì)。
7. 加酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體,使其與特異性結(jié)合的樣本中的待測(cè)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。
8. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體和其他雜質(zhì)。
9. 顯色反應(yīng):加入底物溶液,發(fā)生酶催化反應(yīng),產(chǎn)生有色產(chǎn)物。
10. 終止反應(yīng):加入終止液,停止酶催化反應(yīng)。
11. 檢測(cè):用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的計(jì)算處理方法
1、擬和曲線:
輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進(jìn)入圖表向?qū)?,在“?biāo)準(zhǔn)類(lèi)型"中選擇“xy散點(diǎn)圖";在“子圖表類(lèi)型"中選擇“折線散點(diǎn)圖",按“下一步";選擇“系列產(chǎn)生在行",按“下一步";數(shù)據(jù)標(biāo)志,可以填寫(xiě):如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點(diǎn)擊完成??傻们€圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢(shì)線",在類(lèi)型中,選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、計(jì)算濃度:
第一次實(shí)驗(yàn):
標(biāo)準(zhǔn)曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
注意事項(xiàng)
在進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
1. 保證試劑盒的質(zhì)量:選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過(guò)認(rèn)證的試劑盒,避免使用過(guò)期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作:按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作,避免操作過(guò)程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測(cè)需要在恒溫條件下進(jìn)行,因此要確保實(shí)驗(yàn)過(guò)程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。
5. 空白吸光度值:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。
6. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理:對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析,包括對(duì)異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
7. 質(zhì)量控制:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制,如定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)等,以確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
ELISA試劑盒的作用
ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒,例如抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。
ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。
ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn),可以用于檢測(cè)類(lèi)風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等,在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。
公司簡(jiǎn)介
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)??偛课挥谏虾?,并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷(xiāo)或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,擁有專(zhuān)業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)?!昂V瑪生物"已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可。
Shanghai Duma Biotechnology Co., Ltd. is a high-tech biotechnology enterprise engaged in biological reagents and test kits. Headquartered in Shanghai, with distribution or agency agencies nationwide. The product has established a good brand image of "Duma Biotechnology" due to its reliable and stable quality and relatively complete after-sales service. The company adheres to the development philosophy of "customer centeredness, product assurance, integrity as the foundation, and innovation as the purpose", and has a professional R&D and quality inspection team as well as advanced warehousing and logistics systems. "Duma Biotechnology" has been recognized by scientific researchers nationwide and has become a well-known brand highly praised by distributors.
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