猴神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)酶聯(lián)免疫試劑盒  

產(chǎn)品包裝：盒裝

性狀：瓶裝液體

規(guī)格：96T/48T

保存條件：2-8℃

保存期限：6個(gè)月

運(yùn)輸條件：2-8℃低溫運(yùn)輸，用干冰或者生物冰袋低溫運(yùn)輸。

猴神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)酶聯(lián)免疫試劑盒 

   標(biāo)本的稀釋原則：首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N"倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N"。 

   標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 

   生物su標(biāo)記抗體的稀釋原則：臨用前以生物su標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su標(biāo)記抗體加990μl生物su標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。 

   辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 抗原包被：將抗原溶液加入到酶標(biāo)板孔中，包被抗原，使其在孔底形成一層薄膜。

2. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。

3. 阻斷：加入阻斷液，封閉酶標(biāo)板孔中的非特異性結(jié)合位點(diǎn)，以減少非特異性結(jié)合。

4. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。

5. 加樣：加入待測(cè)樣本，使其與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。

6. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的樣本和其他雜質(zhì)。

7. 加酶標(biāo)抗體：加入酶標(biāo)記的抗體，使其與特異性結(jié)合的樣本中的待測(cè)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。

8. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體和其他雜質(zhì)。

9. 顯色反應(yīng)：加入底物溶液，發(fā)生酶催化反應(yīng)，產(chǎn)生有色產(chǎn)物。

10. 終止反應(yīng)：加入終止液，停止酶催化反應(yīng)。

11. 檢測(cè)：用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度值，記錄數(shù)據(jù)。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的計(jì)算處理方法

1、擬和曲線：

輸入第一行： 濃度值， 如0 10 50 100 400

輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42

選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進(jìn)入圖表向?qū)?，在“?biāo)準(zhǔn)類型"中選擇“xy散點(diǎn)圖";在“子圖表類型"中選擇“折線散點(diǎn)圖"，按“下一步";選擇“系列產(chǎn)生在行"，按“下一步";數(shù)據(jù)標(biāo)志，可以填寫：如數(shù)據(jù)y軸，OD值;數(shù)據(jù)x軸，濃度;按下一步，點(diǎn)擊完成。可得曲線圖。

單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢(shì)線"，在類型中，選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中，選擇顯示公式，選擇顯示R平方值。

得到公式和R平方值。

也可以用上面說的方法： 雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。

2、計(jì)算濃度：

第一次實(shí)驗(yàn)：

標(biāo)準(zhǔn)曲線為：

y = -4E-05x2 + 0.026x

R2 = 0.9745

為例，已知OD值，計(jì)算濃度。

由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：

4E-05x2 -0.026x +y=0

ax2 +bx +y=0

注意事項(xiàng)

在進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：

1. 保證試劑盒的質(zhì)量：選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒，避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。

2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作：按照試劑盒說明書進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作，避免操作過程中的人為誤差。

3. 避免交叉污染：在實(shí)驗(yàn)過程中，要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染，以免影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 溫度控制：ELISA檢測(cè)需要在恒溫條件下進(jìn)行，因此要確保實(shí)驗(yàn)過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。

5. 空白吸光度值：在實(shí)驗(yàn)過程中，要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性，避免其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

6. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理：對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析，包括對(duì)異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

7. 質(zhì)量控制：在實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制，如定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)等，以確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

ELISA試劑盒的作用

ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒，例如抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。

ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。

ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn)，可以用于檢測(cè)類風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等，在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。

公司簡(jiǎn)介

     上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。總部位于上海，并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉儲(chǔ)和物流系統(tǒng)?！昂V瑪生物"已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可。

Shanghai Duma Biotechnology Co., Ltd. is a high-tech biotechnology enterprise engaged in biological reagents and test kits. Headquartered in Shanghai, with distribution or agency agencies nationwide. The product has established a good brand image of "Duma Biotechnology" due to its reliable and stable quality and relatively complete after-sales service. The company adheres to the development philosophy of "customer centeredness, product assurance, integrity as the foundation, and innovation as the purpose", and has a professional R&D and quality inspection team as well as advanced warehousing and logistics systems. "Duma Biotechnology" has been recognized by scientific researchers nationwide and has become a well-known brand highly praised by distributors.

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