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簡要描述:大豆胰蛋百酶抑制因子(ti)ELISA試劑盒質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測服務(wù)。您只需提供代測樣本,七個工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
大豆胰蛋百酶抑制因子(ti)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種常用的免疫學(xué)檢測技術(shù),其基本原理是利用抗原與抗體之間的特異性結(jié)合反應(yīng),通過酶促反應(yīng)放大信號,檢測微量的蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)。ELISA實(shí)驗(yàn)中所需的試劑和耗材需滿足一定的質(zhì)量要求,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
大豆胰蛋百酶抑制因子(ti)ELISA試劑盒
供體外研究使用,不用于臨床診斷!
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T(可拆)
產(chǎn)品數(shù)量:咨詢
產(chǎn)品應(yīng)用:ELISA實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本希釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
操作步驟:
1. 加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl。注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。每次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果樣品濃度過高,可以用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生務(wù)素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生務(wù)素標(biāo)記抗體加99μl生務(wù)素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
3. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生務(wù)素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
注意事項
在進(jìn)行ELISA檢測時,需要注意以下幾點(diǎn):
1. 保證試劑盒的質(zhì)量:選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒,避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作:按照試劑盒說明書進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作,避免操作過程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實(shí)驗(yàn)過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測需要在恒溫條件下進(jìn)行,因此要確保實(shí)驗(yàn)過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。
5. 空白吸光度值:在實(shí)驗(yàn)過程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對檢測結(jié)果的影響。
6. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理:對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析,包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
7. 質(zhì)量控制:在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制,如定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等,以確保實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
洗板方法
1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5次。
2.自動洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
[售后]
試劑盒售后:本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量,質(zhì)量問題均可免費(fèi)退換,另提供免費(fèi)代測服務(wù)。
細(xì)胞售后:
1、細(xì)胞運(yùn)輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2、細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題,請?zhí)峁┘?xì)胞照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題的照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟,并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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