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簡要描述:豬胸腺白血病抗原(TLA) ELISA 試劑盒 上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機構提供各類品質過硬,價格實惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術,保證產品均能現(xiàn)貨供應和產品質量的穩(wěn)定性,相關活動信息可聯(lián)系客服。
豬胸腺白血病抗原(TLA) ELISA 試劑盒
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
豬胸腺白血病抗原(TLA) ELISA 試劑盒
樣本處理
在處理樣本時,需要保證無菌操作,避免污染。同時,需要按照試劑盒說明書的要求,將樣本進行適當?shù)南♂尯吞幚怼H绻麡颖局写嬖陔s質或顆粒物,需要先進行離心或過濾處理。
準備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本希釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設置好振板器、洗板器
9.準備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標準品
11.配制不同濃度的標準品
12.配制質控品
13.根據(jù)預實驗結果稀釋樣本
14.準備好封板膜
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
實驗步驟
1. 抗原包被:將抗原溶液加入到酶標板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一層薄膜。
2. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的抗原和其他雜質。
3. 阻斷:加入阻斷液,封閉酶標板孔中的非特異性結合位點,以減少非特異性結合。
4. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的阻斷液和其他雜質。
5. 加樣:加入待測樣本,使其與抗原發(fā)生特異性結合。
6. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的樣本和其他雜質。
7. 加酶標抗體:加入酶標記的抗體,使其與特異性結合的樣本中的待測物質發(fā)生反應。
8. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的酶標抗體和其他雜質。
9. 顯色反應:加入底物溶液,發(fā)生酶催化反應,產生有色產物。
10. 終止反應:加入終止液,停止酶催化反應。
11. 檢測:用酶標儀測定各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。
注意事項
在進行ELISA檢測時,需要注意以下幾點:
1. 保證試劑盒的質量:選擇質量可靠、經過認證的試劑盒,避免使用過期或質量不穩(wěn)定的試劑。
2. 標準化操作:按照試劑盒說明書進行標準化操作,避免操作過程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實驗過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測結果的準確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測需要在恒溫條件下進行,因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準確性。
5. 空白吸光度值:在實驗過程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對檢測結果的影響。
6. 實驗數(shù)據(jù)的處理:對實驗數(shù)據(jù)進行正確的處理和分析,包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉換等,以確保結果的準確性和可靠性。
7. 質量控制:在實驗過程中,應進行必要的質量控制,如定期進行室內質控和室間質評等,以確保實驗室檢測結果的準確性。
洗板方法
1.手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5次。
2.自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
[售后]
試劑盒售后:本公司出售的試劑盒均保質保量,質量問題均可免費退換,另提供免費代測服務。
細胞售后:
1、細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2、細胞收到當天以及第2,3天請拍照,未告知的視為產品合格。4-10天內出現(xiàn)問題,請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關操作的詳細步驟,并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我或者隨貨說明書相關售后條款。
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