人妊娠相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒

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試劑盒特點(diǎn):

1、靈敏度:有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力;

2、特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測定結(jié)果升

高，可能導(dǎo)致假陽性，所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo);

3、精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍:

4、準(zhǔn)確度:通過添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評價:

5、簡便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下，實(shí)驗(yàn)和測定步驟越少越好，在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡

單明了，定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡單;

6、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性;

7、經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本，而市場價格比較合理;

8、試劑評價:需要有確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測。

ELISA試劑盒自備物品

1.酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱)

2.微量加液器及吸頭，EP管

3、蒸餾水或去離子水，全新濾紙。

人妊娠相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒的作用

ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒，例如抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測試劑盒。

ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。

ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn)，可以用于檢測類風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等，在臨床診斷、科研和生物制品檢測等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。

試劑盒常見問題及解析

 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。

a.原因：室溫太高(>25℃)。

解決辦法： 若無法降低室內(nèi)溫度，請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時間。

b.原因：底物溶液受到污染。

解決辦法： 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色，請不要再使用。

c.原因：反應(yīng)時間超過太久。

解決辦法：請控制反應(yīng)時間。

d.原因：酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。

解決辦法：使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)

陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。

a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。

解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。

b.原因：洗板過程發(fā)生問題(同2-f.)。

解決辦法：請參考2-f.

c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。

解決辦法： 請參考2-d.

 ELISA的發(fā)展史：

1√ 目前，分子生物學(xué)正在并肯定會讓我們對整個生命科學(xué)有一個全面而*的認(rèn)識，其對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的。

2√ ELISA測定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展，而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。

3√ ELISA試劑盒它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定變得輕而易舉，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。