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簡要描述:人激酶錨定蛋白1(AKAP1)ELISA試劑盒 :質(zhì)量穩(wěn)定,準確性高。篤瑪生物全程提供技術指導,確保您實驗結果的準確性還提供免費代測服務。您只需提供代測樣本,七個工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
人激酶錨定蛋白1(AKAP1)ELISA試劑盒
試劑盒性能
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結合,因此試驗的特異性很高,能夠排除其他物質(zhì)的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大提高,能夠檢測出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易掌握,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。
用途:
主要用于定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其他相關生物液體中的含量。
產(chǎn)品保存:
2-8℃、有效期6個月,我司單核細胞趨化蛋白1(MCP1)酶聯(lián)試劑盒均為批次,您可放心選購。
規(guī)格:48T/96T
有效期:6個月
優(yōu)勢:靈敏性高,性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。
2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素),阻止非特異性蛋
白質(zhì)結合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或抗體的樣本。
4)洗滌:去除未結合的物質(zhì)。
5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標記檢測抗體。
6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測抗體。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。
8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。
人激酶錨定蛋白1(AKAP1)ELISA試劑盒
標本的采集及保存
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 (注:標本溶血會影響**檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。)
結果分析
根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值,利用標準品繪制的標準曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
性能:
1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
試劑盒特點
1.專一性強。
抗原與抗體的反應是專一反應,而酶技術以反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。
由于抗體聯(lián)結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射測定法。
3.樣品易保存。
經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。
對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。
溶液中的抗原物質(zhì),應用酶免吸附技術進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行酶技術的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。
如有成千上萬份樣品需要進行檢測,酶技術都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。
對沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置.
*特別提醒*
1.取樣和存樣所用的凍存管、離心管、吸頭等需高溫滅菌處理;
2.所有存樣管口需以封口膜封好;
3.所有樣品管壁需要用防水記號筆清晰標明編號(便于區(qū)分即可);
免責聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔, 本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔
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