兔腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 

四大特性：    

1．特異性強(qiáng)：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高： 實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些

   科研ELISA在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。

ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進(jìn)程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標(biāo)本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確保混和。

一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。

1、血清：用無(wú)菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。

2、尿液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

3、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。

4、胸腹水：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

5、腦脊液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

6、唾液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

8、牛奶：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

如何使用ELISA試劑盒

如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對(duì)結(jié)果影響大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問(wèn)題呢，下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法：

1．在使用過(guò)程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國(guó)等）；

2．仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳；

3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來(lái)水、礦泉水等。

4．認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。

5．樣品加樣

（1）加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯(cuò)加。

（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。

6．洗滌

（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；

（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；

（3）可選用塑料洗滌瓶。

7．加酶反應(yīng)

（1）包括陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；

（2）包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi)，各孔均無(wú)顯色；

（3）陽(yáng)性對(duì)照不顯色，而其它樣本顯色正常；

（4）有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽(yáng)性困難。

兔腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒  

ELISA試劑盒在使用之時(shí)還需要注意哪些問(wèn)題？

1. elisa試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7. 底物a應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物b對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取od值。

8. 加入elisa試劑盒的順序應(yīng)一致，elisa試劑盒以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

9. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

科研ELISA檢測(cè)過(guò)程中的注意事項(xiàng)

1、要移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但*有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。

3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果穩(wěn)定。

4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

6、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。

8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

9、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

11、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

12、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

15、待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。

16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

18、對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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上海篤瑪生物科技有限公司主要經(jīng)營(yíng)生產(chǎn)ELISA試劑盒，抗體，原料藥，植物提取物，品質(zhì)，價(jià)格。公司秉承價(jià)格低，品質(zhì)好，客戶之上的原則努力將生命科學(xué)產(chǎn)品提供給廣大的科研工作者。

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免責(zé)聲明

試劑盒供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，不同批號(hào)不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。