綿羊單核細胞(MCP-3) ELISA 試劑盒 

如何更好使用ELISA試劑盒
如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢，下面為您介紹以下幾點使用方法：
1．在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；
2．仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。
4．認真閱讀使用說明書。
5．樣品加樣
（1）加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
6．洗滌
（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
（3）可選用塑料洗滌瓶。
7．加酶反應(yīng)
（1）包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
（2）包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；
（3）陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；
（4）有些標本顯色不深，判斷陽性困難。

特別說明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃，需長時間存放或多次使用建議存于-20℃.

ELISA試劑盒優(yōu)點：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復(fù)性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
5、可檢測指標齊全：細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內(nèi)分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等；
6、質(zhì)量保證，限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標準品或樣品各100μL，37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入100μL化抗體工作液，37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液，37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液，37°C孵育5分鐘左右
7.立即測定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計算




ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標本，然后在微型顫動器上顫動1分鐘以確?；旌?。

一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，跨過一星期測定的需低溫冰存。
1、血清：用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。
2、尿液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
3、血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
7、細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

注：
1.以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月，-80℃不應(yīng)超過2個月。

2.如果樣本種類在實驗手冊中沒有提到，一般需要做預(yù)實驗以確定試劑盒能被用來檢測您的樣品。

3.用于組織或細胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會影響ELISA實驗結(jié)果。

4.由于其他來源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配（例如，抗體的目標，是構(gòu)象表位而不是線性表位），其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無法被本公司試劑盒所識別。

5.由于包括細胞活力，細胞數(shù)量，以及采樣時間等因素，從細胞培養(yǎng)上清液提取的樣品，可能無法被檢測。

6.建議采用新鮮樣品來檢測，不要存放時間過長。否則，蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生，*終導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

7.標本溶血會影響*后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測

綿羊單核細胞(MCP-3) ELISA 試劑盒  

如何更好使用ELISA試劑盒
如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢，下面為您介紹以下幾點使用方法：
1．在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；
2．仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。
4．認真閱讀使用說明書。
5．樣品加樣
（1）加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
6．洗滌
（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
（3）可選用塑料洗滌瓶。
7．加酶反應(yīng)
（1）包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
（2）包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；
（3）陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；
（4）有些標本顯色不深，判斷陽性困難。

特別說明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃，需長時間存放或多次使用建議存于-20℃.

ELISA試劑盒優(yōu)點：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復(fù)性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
5、可檢測指標齊全：細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內(nèi)分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等；
6、質(zhì)量保證，限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標準品或樣品各100μL，37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入100μL化抗體工作液，37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液，37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液，37°C孵育5分鐘左右
7.立即測定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計算




ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標本，然后在微型顫動器上顫動1分鐘以確?；旌汀?/span>

一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，跨過一星期測定的需低溫冰存。
1、血清：用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。
2、尿液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
3、血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
7、細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

注：
1.以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月，-80℃不應(yīng)超過2個月。

2.如果樣本種類在實驗手冊中沒有提到，一般需要做預(yù)實驗以確定試劑盒能被用來檢測您的樣品。

3.用于組織或細胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會影響ELISA實驗結(jié)果。

4.由于其他來源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配（例如，抗體的目標，是構(gòu)象表位而不是線性表位），其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無法被本公司試劑盒所識別。

5.由于包括細胞活力，細胞數(shù)量，以及采樣時間等因素，從細胞培養(yǎng)上清液提取的樣品，可能無法被檢測。

6.建議采用新鮮樣品來檢測，不要存放時間過長。否則，蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生，*終導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

7.標本溶血會影響*后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測