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簡(jiǎn)要描述:綿羊骨成型蛋白(BMPR2) ELISA 試劑盒 :質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。您只需提供代測(cè)樣本,七個(gè)工作日內(nèi)即可為您提供代測(cè)數(shù)據(jù)。歡迎前來(lái)咨詢,訂購(gòu)。
如何更好使用ELISA試劑盒
如:加樣器不確,尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問(wèn)題呢,下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法:
1.在使用過(guò)程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等);
2.仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
3.必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來(lái)水、礦泉水等。
4.認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書。
5.樣品加樣
(1)加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。
(2)加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
6.洗滌
(1)每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
(2)選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
(3)可選用塑料洗滌瓶。
7.加酶反應(yīng)
(1)包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
(2)包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi),各孔均無(wú)顯色;
(3)陽(yáng)性對(duì)照不顯色,而其它樣本顯色正常;
(4)有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽(yáng)性困難。
特別說(shuō)明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃,需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、重復(fù)性和可靠性高;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等;
6、質(zhì)量保證,限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL,37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體,拍干,加入100μL化抗體工作液,37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液,37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液,37°C孵育5分鐘左右
7.立即測(cè)定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計(jì)算
ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:在這一進(jìn)程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確保混和。
一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。
1、血清:用無(wú)菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。
2、尿液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
注:
1.以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。
2.如果樣本種類在實(shí)驗(yàn)手冊(cè)中沒(méi)有提到,一般需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定試劑盒能被用來(lái)檢測(cè)您的樣品。
3.用于組織或細(xì)胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4.由于其他來(lái)源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配(例如,抗體的目標(biāo),是構(gòu)象表位而不是線性表位),其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無(wú)法被本公司試劑盒所識(shí)別。
5.由于包括細(xì)胞活力,細(xì)胞數(shù)量,以及采樣時(shí)間等因素,從細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取的樣品,可能無(wú)法被檢測(cè)。
6.建議采用新鮮樣品來(lái)檢測(cè),不要存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。否則,蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生,*終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
7.標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)
如何更好使用ELISA試劑盒
如:加樣器不確,尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問(wèn)題呢,下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法:
1.在使用過(guò)程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等);
2.仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
3.必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來(lái)水、礦泉水等。
4.認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書。
5.樣品加樣
(1)加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。
(2)加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
6.洗滌
(1)每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
(2)選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
(3)可選用塑料洗滌瓶。
7.加酶反應(yīng)
(1)包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
(2)包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi),各孔均無(wú)顯色;
(3)陽(yáng)性對(duì)照不顯色,而其它樣本顯色正常;
(4)有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽(yáng)性困難。
特別說(shuō)明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃,需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、重復(fù)性和可靠性高;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等;
6、質(zhì)量保證,限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL,37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體,拍干,加入100μL化抗體工作液,37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液,37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液,37°C孵育5分鐘左右
7.立即測(cè)定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計(jì)算
ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:在這一進(jìn)程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確保混和。
一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。
1、血清:用無(wú)菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。
2、尿液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
注:
1.以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。
2.如果樣本種類在實(shí)驗(yàn)手冊(cè)中沒(méi)有提到,一般需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定試劑盒能被用來(lái)檢測(cè)您的樣品。
3.用于組織或細(xì)胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4.由于其他來(lái)源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配(例如,抗體的目標(biāo),是構(gòu)象表位而不是線性表位),其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無(wú)法被本公司試劑盒所識(shí)別。
5.由于包括細(xì)胞活力,細(xì)胞數(shù)量,以及采樣時(shí)間等因素,從細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取的樣品,可能無(wú)法被檢測(cè)。
6.建議采用新鮮樣品來(lái)檢測(cè),不要存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。否則,蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生,*終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
7.標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)
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