僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

猴輔肌動蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)免疫試劑盒  

實驗原理

酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，通過酶對底物反應(yīng)的顯色反應(yīng)，對樣本中的待測物質(zhì)進行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強、操作簡便、適用范圍廣等特點，因此在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和食品安全檢測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。

產(chǎn)品包裝：盒裝

性狀：瓶裝液體

規(guī)格：96T/48T

保存條件：2-8℃

保存期限：6個月

運輸條件：2-8℃低溫運輸，用干冰或者生物冰袋低溫運輸。

準(zhǔn)備工作

1.孔板室溫平衡1小時

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒

5.準(zhǔn)備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器

9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說明書提示，溶解標(biāo)準(zhǔn)品

11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果稀釋樣本

14.準(zhǔn)備好封板膜

猴輔肌動蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)免疫試劑盒

實驗步驟

1. 抗原包被：將抗原溶液加入到酶標(biāo)板孔中，包被抗原，使其在孔底形成一層薄膜。

2. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。

3. 阻斷：加入阻斷液，封閉酶標(biāo)板孔中的非特異性結(jié)合位點，以減少非特異性結(jié)合。

4. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。

5. 加樣：加入待測樣本，使其與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。

6. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的樣本和其他雜質(zhì)。

7. 加酶標(biāo)抗體：加入酶標(biāo)記的抗體，使其與特異性結(jié)合的樣本中的待測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。

8. 清洗：清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體和其他雜質(zhì)。

9. 顯色反應(yīng)：加入底物溶液，發(fā)生酶催化反應(yīng)，產(chǎn)生有色產(chǎn)物。

10. 終止反應(yīng)：加入終止液，停止酶催化反應(yīng)。

11. 檢測：用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度值，記錄數(shù)據(jù)。

試劑盒組成

注意事項

在進行ELISA檢測時，需要注意以下幾點：

1. 保證試劑盒的質(zhì)量：選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒，避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。

2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作：按照試劑盒說明書進行標(biāo)準(zhǔn)化操作，避免操作過程中的人為誤差。

3. 避免交叉污染：在實驗過程中，要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染，以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 溫度控制：ELISA檢測需要在恒溫條件下進行，因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。

5. 空白吸光度值：在實驗過程中，要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性，避免其對檢測結(jié)果的影響。

6. 實驗數(shù)據(jù)的處理：對實驗數(shù)據(jù)進行正確的處理和分析，包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

7. 質(zhì)量控制：在實驗過程中，應(yīng)進行必要的質(zhì)量控制，如定期進行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等，以確保實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實驗室安全

1. 實驗室應(yīng)定期進行安全檢查，確保設(shè)備、設(shè)施完好有效。

2. 實驗室應(yīng)按規(guī)定配備消防器材、急救箱等安全設(shè)施，并定期檢查其使用狀態(tài)。

3. 在實驗室內(nèi)不得擅自更改電器線路或使用未經(jīng)批準(zhǔn)的電器設(shè)備。

4. 實驗室內(nèi)的消防通道、安全出口等應(yīng)保持暢通無阻，嚴(yán)禁堆放雜物。

5. 在進行高溫、低溫、高壓、真空等危險性實驗時，必須采取相應(yīng)的安全措施，確保人員和設(shè)備安全。

6. 實驗室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙和吃東西，以免引起火災(zāi)或中毒等安全事故。

7. 在實驗室內(nèi)應(yīng)保持安靜，不得大聲喧嘩或擅自離崗，以免影響實驗的進行和實驗室的安全。

8. 實驗室內(nèi)的門窗、玻璃等易損部位應(yīng)保持完好無損，如有損壞應(yīng)及時報修。

9. 在進行易燃、易爆、有毒、有害或其他危險性實驗時，必須至少有兩人同時在場，以便相互照應(yīng)和應(yīng)對突發(fā)情況。

10. 實驗室內(nèi)的儀器、試劑等應(yīng)按規(guī)定進行標(biāo)識和管理，以確保使用正確和安全可靠。

11. 實驗室內(nèi)應(yīng)保持適宜的溫度和濕度，避免影響實驗結(jié)果和設(shè)備的正常運行。

12. 在實驗室內(nèi)不得私自拆卸或修理設(shè)備儀器，如有需要應(yīng)請專業(yè)人員協(xié)助處理。

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