猴血小板反應(yīng)蛋白4(TSP-4)酶聯(lián)免疫試劑盒 

試劑盒組成

試劑盒性能

1. 檢測(cè)范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：檢測(cè)濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

準(zhǔn)備工作

1.孔板室溫平衡1小時(shí)

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準(zhǔn)備各型號(hào)的移液槍、槍頭、量筒

5.準(zhǔn)備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本希釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器

9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說(shuō)明書(shū)提示，溶解標(biāo)準(zhǔn)品

11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本

14.準(zhǔn)備好封板膜

操作步驟

1. 加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl。注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。每次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果樣品濃度過(guò)高，可以用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物su標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl生物su標(biāo)記抗體加99μl生物su標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

3. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物su標(biāo)記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

4. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

5. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

猴血小板反應(yīng)蛋白4(TSP-4)酶聯(lián)免疫試劑盒 

結(jié)果判斷

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5次。

2.自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

ELISA試劑盒適用行業(yè)

ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、臨床醫(yī)學(xué)和工業(yè)等領(lǐng)域。

1.在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，ELISA試劑盒可以用于檢測(cè)細(xì)胞因子、激素、酶、抗體等分子的含量和活性，用于生理學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等研究領(lǐng)域。

2.在臨床醫(yī)學(xué)診斷中，ELISA試劑盒可以用于檢測(cè)血清中的腫瘤標(biāo)志物、病毒抗體、心肌酶等指標(biāo)，用于臨床診斷及疾病監(jiān)測(cè)。

3.在食品安全檢測(cè)中，ELISA試劑盒可以用于檢測(cè)食品中的抗生素殘留、農(nóng)藥殘留等有害物質(zhì)，用于食品質(zhì)量檢測(cè)和安全評(píng)估。

4.在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，ELISA試劑盒可以用于檢測(cè)環(huán)境中的化學(xué)物質(zhì)、微生物等污染物，用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和污染治理。

5.在動(dòng)物疾病防控中，ELISA試劑盒可以用于檢測(cè)動(dòng)物血清中的病毒抗體、細(xì)菌抗原等指標(biāo)，用于動(dòng)物疫病防控和獸藥殘留檢測(cè)。

總之，ELISA試劑盒在許多行業(yè)中都有廣泛的應(yīng)用。

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